国产免费无码一区二区视频,妺妺窝人体色WWW看人体,国产精品无码一区二区三区免费,蜜桃AV噜噜一区二区三区

您的位置: 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 玩轉(zhuǎn)不同類型細(xì)胞傳代方法

玩轉(zhuǎn)不同類型細(xì)胞傳代方法

更新時(shí)間:2022-06-17瀏覽:1665次

根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的培養(yǎng)細(xì)胞傳代方法。懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞可以用直接吹打或離心分離后傳代,或自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用直接吹打即可傳代。


細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)常用的酶為胰蛋白酶,它可以破壞細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與培養(yǎng)瓶之間的細(xì)胞連接或接觸,從而使它們之間的連接減弱或*消失。經(jīng)胰蛋白酶處理后的貼壁細(xì)胞在外力(如吹打)的作用下可以分散成單個(gè)細(xì)胞,再經(jīng)稀釋和接種后就可以為細(xì)胞生長(zhǎng)提供足夠的營(yíng)養(yǎng)和空間,達(dá)到細(xì)胞傳代培養(yǎng)的目的。

圖片



01



貼壁細(xì)胞的消化法傳代

圖片



 

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。



 

向瓶?jī)?nèi)加入3-5ml PBS,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,使PBS流過所有細(xì)胞表面,然后吸掉或倒掉PBS后再加1~2 mL新的消化液進(jìn)行消化。



 

最好在37℃或25 ℃以上室溫環(huán)境下進(jìn)行消化。消化2~5 min后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即終止消化。



 

加*培養(yǎng)基3-5ml,終止消化。



 

用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,吹打過程要順序進(jìn)行,從培養(yǎng)瓶底部一邊開始到另一邊結(jié)束,以確保所有底部都被吹到。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔不要用力過猛,同時(shí)盡可能不要出現(xiàn)泡沫,這些都會(huì)對(duì)細(xì)胞有損傷。細(xì)胞脫離瓶壁后形成細(xì)胞懸液。



 

計(jì)數(shù),分別接種在新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。











02



懸浮細(xì)胞的傳代

圖片

圖片

因懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞不貼壁,故傳代時(shí)不必采用酶消化方法,而可直接傳代或離心收集細(xì)胞后傳代。直接傳代即讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2~2/3,然后用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后,再傳代。懸浮細(xì)胞常采用離心方法傳代,即將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),800~1 000 r/min離心5 min,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),用吸管吹打形成細(xì)胞懸液,然后傳代接種。











03



半懸浮細(xì)胞的傳代

圖片

圖片

半懸浮細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,可不經(jīng)消化處理直接吹打使細(xì)胞從瓶壁上脫落下來,而進(jìn)行傳代。但這種方法僅限于部分貼壁不牢的細(xì)胞,如SP2/0細(xì)胞等。直接吹打?qū)?xì)胞損傷較大,細(xì)胞也常有大量丟失,因而絕大部分貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞均需消化后,才能吹打傳代。


推薦產(chǎn)品



【SNT-002】0.25%胰酶(含EDTA)

【SNB-001】PBS(Phosphate Buffer Saline) 磷酸鹽緩沖液 1x

【SNL-120】SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)


END




 

聯(lián)系我們
  • QQ:1242926414
  • 郵箱:1242926414@qq.com
  • 傳真:86-027-87800889
  • 地址:武漢東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號(hào)武漢光谷國(guó)際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期C22棟二層

掃一掃,關(guān)注公眾號(hào)

©2025 武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):鄂ICP備2020018368號(hào)-2    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    Sitemap.xml    總訪問量:164261    管理登陸

无码AⅤ精品一区二区三区浪潮| 久久精品国产亚洲AV水果派 | 蜜臀98精品国产免费观看| 成人电影免费看| 麻豆亚洲AV成人无码久久精品| 农村熟妇高潮精品a片| 色婷婷亚洲精品天天综合影院| 狠狠色欧美亚洲狠狠色WWW| 国产AⅤ无码专区亚洲AV| 国产免费又色又爽粗视频| 人妻AⅤ无码一区二区三区| 人妻无码一区二区三区TV| 雯雯被四个男人拖进工地| 成人电影免费看| 7777色鬼XXXX欧美色妇| 亚洲精品午夜久久久伊人| 滋润岳的性饥渴| 被迫穿丁字内裤带着震蛋出门小说 | 一本一道波多野结衣av视频| 春药play揉屁股play男男| 亚洲精品无码久久久| 国产精品成人啪精品视频免费网站| 在线看片无码永久免费视频| 小荡货女友h调教| 婉莹满足了十几个农民工| 国产大屁股喷水视频在线观看| 国产精品国产三级国产普通话| 国内少妇毛片视频| 日本做爰高潮又黄又爽| 苏桃的骚乱文肉np| 出轨h客厅激情嗯啊呻吟| 国产风流老太婆大bbbhd视频 | 小sb几天没做sao死了| 免费AV网站| av无码一区二区三区| 全黄性性激高免费视频| 国产V亚洲V天堂A无码久久蜜桃| 公交车被CAO得合不拢腿| 淫荡少妇白洁| 99久久国产极品蜜臀av酒店| 年轻护士的滋味中文字幕|